正交试验法优化菊粉外切酶水解菊粉的工艺钻研（二）

（2）底物浓度

底物浓度对于酶解下场的正交影响如图2，底物浓度越大酶解功能越低，试验水解抵达高复原糖患上率所需的法优粉外光阴就越长。在反映妨碍到60h的化菊时候底物浓度为10g/L的患上率为67.25%，底物浓度为70g/L的切酶患上率惟独48.42%。在实际破费历程中，菊粉过高或者过低的艺钻研底物浓度都不合适用来工业破费，因此抉择30g/L、正交40g/L、试验水解50g/L妨碍优化试验。法优粉外

（3）pH

pH对于复原糖患上率的化菊影响如图3所示，从图中可能看出，切酶随着pH的菊粉飞腾外切酶的酶解下场越来越好。在pH为3时反映60h复原糖患上率可能抵达73.38%。艺钻研以是正交抉择pH为三、四、5妨碍优化试验。

（4）加酶量

加酶量对于酶解下场的影响如图4，加酶量越大抵达反映失调的光阴就越短酶解下场就越好。加酶量为20U/g时反映60h的复原糖患上率为42.18%，加酶量为100U/g，反映36h即可达70.13%。尽管加酶量越大酶解下场就越好，但综合经济因素，抉择40U/g，60U/g，80U/g妨碍优化试验。

二、正交试验服从

运用Minitab妨碍正交试验合成，凭证艰深线性模子妨碍方差合成。极差合乐成果表明，各因素的主次挨次为：D（加酶量）＞C（底物浓度）＞B（pH）＞A（温度）。表3的方差合乐成果表明加酶量D，底物浓度C是清晰的影响因素与极差合乐成果相宜合。思考到工业破费中的经济因素，pH越挨近中性削减的缓冲剂就越少，质料老本就越低因此抉择pH=5；较低的温度所需的能耗就越低，因此抉择温度为450C。散漫方差与极差服从合成菊粉外切酶酶解最佳的工艺条件为A₁B₃C₃D₃，即抉择450C的反映温度，pH为5，底物浓度50g/L，加酶量80U/g作为酶解的最佳反映条件。

三、一再性试验服从

凭证正交试验的论断妨碍验证试验，在45⁰C，pH=5，加酶量为80U/g，底物浓度为50g/L的条件下反映60h。妨碍6组平行试验服从如表4，一再6组平行试验平均患上率为83.63%。汪伦记等运用试验室自纯化菊粉外切酶可能抵达73.52%的酶解率（界说与本文中患上率界说相同）。菊粉酶源头差距，菊粉质料产地差距可能是酶解率可能是酶解率差距的主要原因。

三、论断

本试验接管菊粉外切酶酶解菊粉破费高果糖浆，经由单因素试验与正交试验，患上出各因素影响复原糖患上率的巨细挨次挨次为：底物浓度＞加酶量＞pH＞温度。最终判断最佳酶解条件为：底物浓度为50g/L，加酶量80U/g（底物），pH=5，温度45⁰C，在此最优条件下可能取患上83.63%的复原糖患上率。一再性试验剖析，该妄想具备精采的一再性，可为工业破费高果糖浆提供实际凭证与参考。

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